凝膠滲透色譜儀（GPC）是一種基于分子體積差異實(shí)現(xiàn)分離的分析儀器，主要用于高分子物質(zhì)的分子量及其分布測(cè)定。其核心原理是利用多孔性凝膠作為固定相，當(dāng)高分子溶液流經(jīng)色譜柱時(shí)，分子體積大于凝膠孔徑的組分無(wú)法進(jìn)入孔隙，直接通過(guò)色譜柱間隙快速流出；中等體積分子部分進(jìn)入孔隙產(chǎn)生滯留效應(yīng)；最小分子則完q滲透到所有孔隙中導(dǎo)致最長(zhǎng)保留時(shí)間。這一過(guò)程遵循分子流體力學(xué)體積與保留時(shí)間的反比關(guān)系，從而實(shí)現(xiàn)分子量分級(jí)。

　　該儀器主要由泵系統(tǒng)、進(jìn)樣器、色譜柱和檢測(cè)系統(tǒng)組成。泵系統(tǒng)維持恒定流速，壓力上限可達(dá)600bar；檢測(cè)系統(tǒng)支持示差折光、紫外、光散射等多類型檢測(cè)器，可測(cè)定相對(duì)分子量、絕對(duì)分子量等參數(shù)。主流設(shè)備如東曹HLC-8420GPC、Polymer Char高溫GPC等均實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化操作與高精度檢測(cè)，部分型號(hào)柱溫可達(dá)250℃，支持高溫溶解后降溫析出樣品的測(cè)試。

　　凝膠滲透色譜儀的常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法：

　　1、柱相關(guān)問(wèn)題

　　柱堵塞

　　原因：樣品中的雜質(zhì)、溶劑殘留，或流動(dòng)相中的物質(zhì)在柱內(nèi)析出等。

　　解決方法：定期進(jìn)行柱的清洗和保養(yǎng)；選擇合適的柱材料和適當(dāng)?shù)纳V條件，如過(guò)濾樣品、使用合適的流動(dòng)相等；對(duì)于嚴(yán)重堵塞的柱子，可能需要更換新的色譜柱。

　　柱老化或損壞

　　原因：長(zhǎng)時(shí)間使用、樣品超載、流動(dòng)相pH值不合適、柱溫過(guò)高或過(guò)低等因素導(dǎo)致柱效降低、固定相流失等。

　　解決方法：根據(jù)柱子的使用壽命和使用情況，適時(shí)更換新的色譜柱；控制進(jìn)樣量，避免柱超載；調(diào)節(jié)流動(dòng)相pH值在合適范圍，一般為3-7.5；保持柱溫穩(wěn)定，避免溫度過(guò)高或過(guò)低對(duì)柱子造成損害。

　　保留時(shí)間變化

　　原因：流速不穩(wěn)定、溫度波動(dòng)、色譜柱老化、流動(dòng)相組成改變、等度與梯度間未能充分平衡等。

　　解決方法：檢查流速設(shè)置是否正確，必要時(shí)進(jìn)行流速校正；確保柱溫恒定，可配置恒溫箱來(lái)控制溫度；用合適的流動(dòng)相充分平衡柱子，使其達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)；保持流動(dòng)相組成的一致性，避免流速波動(dòng)。

　　2、檢測(cè)器問(wèn)題

　　噪聲問(wèn)題

　　原因：儀器連接和電源線問(wèn)題、外部電磁干擾、檢測(cè)器光源不穩(wěn)定、流動(dòng)相中有氣泡、柱子或流路污染等。

　　解決方法：檢查儀器的連接和電源線是否完好，排除外部電磁干擾的可能性；若噪聲信號(hào)仍然存在，可考慮更換或維修儀器；對(duì)于檢測(cè)器光源不穩(wěn)定的情況，及時(shí)更換光源；對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行脫氣處理，并在柱子后端加背壓；清洗柱子和流路，確保樣品純凈。

　　漂移問(wèn)題

　　原因：儀器不穩(wěn)定、色譜柱異常、檢測(cè)器故障等。

　　解決方法：首先檢查儀器是否穩(wěn)定，排除儀器本身的問(wèn)題；同時(shí)檢查色譜柱是否正常，如有必要，可以更換新的色譜柱；若懷疑檢測(cè)器故障，可聯(lián)系廠家進(jìn)行維修或校準(zhǔn)。

　　靈敏度低

　　原因：光源老化、流動(dòng)相配比不當(dāng)、檢測(cè)器設(shè)置不正確等。

　　解決方法：檢查光源是否老化，及時(shí)更換；調(diào)整流動(dòng)相配比至合適范圍；優(yōu)化檢測(cè)器設(shè)置，如調(diào)整檢測(cè)波長(zhǎng)、增益等參數(shù)。

　　3、進(jìn)樣系統(tǒng)問(wèn)題

　　峰面積重復(fù)性差

　　原因：進(jìn)樣量不準(zhǔn)確、樣品降解、檢測(cè)器響應(yīng)不穩(wěn)定等。

　　解決方法：校準(zhǔn)進(jìn)樣系統(tǒng)，確保進(jìn)樣量的準(zhǔn)確性；檢查樣品的穩(wěn)定性，如有必要，采取冷藏、避光等措施防止樣品降解；檢查檢測(cè)器響應(yīng)是否穩(wěn)定，若不穩(wěn)定，需進(jìn)行維修或更換。

　　出現(xiàn)肩峰

　　原因：樣品體積過(guò)大、樣品溶劑過(guò)強(qiáng)、柱塌陷或形成短路通道、柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效、進(jìn)樣器損壞等。

　　解決方法：控制樣品體積，使總的樣品體積小于第一峰的15%；更換較弱的樣品溶劑，降低其洗脫能力；若柱塌陷或形成短路通道，需更換新柱子，并采用較弱腐蝕性條件；更換燒結(jié)不銹鋼部件，加在線過(guò)濾器過(guò)濾樣品；如進(jìn)樣器損壞，及時(shí)更換進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子。

　　4、數(shù)據(jù)處理問(wèn)題

　　鬼峰

　　原因：進(jìn)樣閥殘余峰、樣品中未知物、柱未平衡、水污染（反相）等。

　　解決方法：每次使用后用強(qiáng)溶劑清洗進(jìn)樣閥，改進(jìn)閥和樣品的清洗方法；對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，去除其中的未知物；用流動(dòng)相作樣品溶劑重新平衡柱，尤其是離子對(duì)色譜；檢查水質(zhì)量，確保使用HPLC級(jí)的水。

　　基線不穩(wěn)定

　　原因：檢測(cè)器、泵或流動(dòng)相的問(wèn)題，如檢測(cè)器光源不穩(wěn)定、泵有脈動(dòng)、流動(dòng)相有氣泡等。

　　解決方法：更換光源、維修泵、排除流動(dòng)相中的氣泡等；同時(shí)檢查軟件是否正常運(yùn)行，數(shù)據(jù)采集卡是否損壞，通訊線路是否暢通，如有故障進(jìn)行相應(yīng)的重啟、更換或檢查修復(fù)操作。